《美食总动员》围绕热爱烹饪的老鼠雷米展开：乡村鼠群中，雷米因能精准辨识安全食物闻名，却痴迷人类烹饪，偷学食神古斯特“任何人都能做饭”的理念，梦想成为大厨。一次意外，鼠群被人类驱赶，雷米与家人失散，漂至巴黎，误打误撞掉进古斯特生前的餐厅后厨。
后厨里，古斯特的私生子林奎尼（厨艺一窍不通）被野心勃勃的经理柯林特刁难，即将被解雇。雷米躲在林奎尼帽子里操控他做菜，一份简单的蔬菜杂烩竟打动了毒舌美食评论家伊戈尔（曾批判古斯特）。两人就此秘密合作，餐厅口碑渐佳，却引柯林特怀疑，试图揭穿“老鼠厨师”的真相。
此时雷米的家人寻来，起初不解，后帮他搜集食材、躲避追查。伊戈尔再次到访时，柯林特搞破坏，雷米率鼠群协同林奎尼完成创新料理。伊戈尔尝后写下震撼评论：“任何人都能烹饪”，打破行业偏见。最终餐厅保留，雷米实现梦想，林奎尼与女厨师甜姐相恋，伊戈尔也成了常客。
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