《乐高迪士尼公主：恶人大集合》以乐高积木构建的童话世界为舞台，讲述公主们联手对抗反派联盟的冒险故事。
某天，白雪公主发现乐高童话城堡外墙出现异常荆棘——反派乌苏拉、库伊拉、玛琳菲森与贾方组成“恶人大联盟”，目标是夺取维持童话能量的童话心石。茉莉驾驶乐高飞毯侦察时被贾方的机械灯神追逐，紧急召集爱丽儿、花木兰、乐佩等公主集结。
反派分工搞破坏：乌苏拉用魔法泡泡困住爱丽儿，库伊拉盯上城堡宝石装饰，玛琳菲森封锁出口，贾方破解心石保护罩。公主们打破单打独斗惯性：花木兰规划战术，乐佩用长发缠住库伊拉的机械狗，爱丽儿用水流冲散魔法，白雪公主用特制苹果道具转移玛琳菲森注意力，茉莉趁机夺回心石。
高潮中，贾方启动机械毁灭装置，公主们合力拼出“童话守护盾”挡在前方，乐佩用长发牵引城堡齿轮机关让装置短路。最终反派被锁进积木牢笼，童话世界恢复和平。片尾彩蛋里，反派们偷偷拆积木越狱，公主们笑着准备迎接下次考验。
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